NY∕T 3188-2018 鸭浆膜炎诊断技术(农业)

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2021-12-26

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ICS 11.220,B 41 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3188一2018,鸭浆膜炎诊断技术,Diagnostic techniques for duck serositis,2018-03 - 15 发布2018 - 06-01 实施,中华人民共和国农业部发布,前言,本标准按照GB/ T 1. 1-2009 给出的规则起草,本标准由农业部兽医局提出,本标准由全国动物卫生标准化技术委员会CSAC/ TC 18 1)归口,本标准起草单位:中国农业科学院兰州兽医研究所,本标准主要起草人:郑福英、刘永生、陈启伟、宫晓炜,NY/T 3188-2018,I,NY/T 3188-2018,引,鸭浆膜炎是由鸭疫里默氏杆菌CRiemerella anatitestifer) 引起的一种鸭的接触性传染病,又称为,新鸭病、鸭败血症、鸭疫综合征、鸭疫巴氏杆菌病等。该病多见于1 周龄~8 周龄的雏鸭,呈急性或慢性,败血症,临诊上主要表现为精神沉郁,采食量下降,眼和鼻分泌物增多,头颈震颤或歪斜,共济失调。由j,检眼观病变为纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎,部分病例出现关节炎,常引起雏鸭大批发病和死亡,目,前已成为危害鸭养殖业的一种最常见的细菌病,鉴于目前我国关于鸭传染性浆膜炎的标准化诊断技术还是空白,因此我们制定了该标准,以便有效,地诊断和监控该病,H,鸭浆膜炎诊断技术,1 范围,本标准规定了鸭浆膜炎的临床诊断和实验室诊断技术要求,本标准适用于鸭浆膜炎的诊断,2 规范性引用文件,下列文件对于本文,件。凡是不注日期的引,NY/ T 541,4.2 临床症状,4. 2. 1 急性病例,4. 2. 1. 1 多见于2 周,4. 2. 1. 2 病鸭表现为倦怠,4. 2. 1. 3 眼、鼻有分泌物,4.2. 1.4 濒死前出现神经症状,头,4. 2. 1.5 病程一般1 d~3 d ,4.2.2 慢性病例,4. 2. 2. 1 多见于4 周龄~7 周龄的鸭,4. 2.2.2 病鸭精神沉郁,食欲降低,NY/T 3188-2018,元素或蛋,4. 2. 2.3 病鸭共济失调,瘟孪性点头或摇头摆尾,前仰后翻,呈仰卧姿态,有时头颈歪斜,做转圈或倒退,运动,最后衰竭死亡,4. 2. 2.4 病程达1 周或1 周以上,4. 3 剖检病变,4. 3. 1 纤维素'性心包炎、肝周炎、气囊炎,l,NY/T 3188-2018,4. 3. 2 慢性病例常见腔距关节及甜关节肿胀,切开见关节液增多,4. 4 结果判定,符合4. 1 中的某些流行特点,病鸭出现4. 2 中的临床症状和4. 3 中的眼观病变,可判断为疑似鸭浆,膜炎,5 实验室诊断,5. 1 样品采集与运输,5. 1. 1 样晶采集,5. 1. 1. 1 样品数量,每个发病鸭群最少选择5 只病鸭采集样品,5. 1. l. 2 血清,选择具有临床症状的活鸭,从颈静脉或翅静脉元菌采集血液1 mL~2 mL ,用常规方法分离血清,5. 1. 1. 3 组织,若为活鸭,从颈动脉放血处死,元菌采集其脑、心脏和肝脏组织,分别放人元菌带有螺旋盖的离心管,中。若为死亡鸭,则直接无菌采集其脑、心脏和肝脏组织,5. 1.2 样晶的运输与储存,5. 1.2. 1 样品采集后,置于冰上冷藏送至实验室,5. l. 2. 2 血清和病料组织冻存于一20 0C 以下,5. 2 鸭庭里默氏杆菌分离鉴定,5.2. 1 仪器,电子天平,光学显微镜,组织破碎仪,低温高速离心机,恒温培养箱,5.2.2 耗材,载玻片,枪头,无菌2mL 和5mL 离心管,一次性培养皿,5.2.3 试剂,灭菌双蒸水或去离子水,膜蛋白陈大豆培养基,膜蛋白陈大豆琼脂培养基,绵羊抗凝血,小牛血清,商品化细菌生化鉴定管,磷酸盐缓冲液(PBS , O. 01 mol/ L ,pH 7.2) 。相关试剂配制方法见附录A,5.2.4 样晶处理,5. 2. 4. 1 无菌取鸭的脑、心脏、肝脏组织O. 5 g~l g ,分别放人5mL 容量的无菌离心管中,在天平上称,量所取病料组织的重量(离心管的重量在加入组织前已经称量),5.2. 4.2 以2mL/ 管加人PBS(O. 01 mol/ L ,pH 7 . 2) ,以50 Hz 在组织破碎仪内研磨3min ,5. 2. 4.3 吸取100 μL 组织混悬液,放入2mL 容量的元菌离心管中,用适量PBS(O. 01 mol/L,pH 7. 2),稀释至1 : 10(ω/ v) , 混匀后取100μL 作为接种材料,5. 2. 5 细菌分离,5. 2. 5. 1 将100μL 组织混悬液涂布于膜蛋白陈大豆琼脂(含5%绵羊血)平板上,倒置放于5 % COz 培,养箱中, 37 0C 培养20 h~24 h ,5 . 2 . 5 . 2 挑取疑似鸭疫里默氏杆菌的单菌落接种到3 mL 膜蛋白陈大豆肉汤(含5 % 小牛血清)中,37 0C 、200 r/ min 振荡培养8 h~10 ho,5.2.5.3 用接种环蘸取少量菌液,划线接种于膜蛋白陈大豆琼脂(含5%小牛血清)平板上,再置于5%,COz 培养箱中, 37 0C 培养20 h~24 h ,5. 2.5.4 挑取符合鸭疫里默氏杆菌菌落特征的单菌落,再次接种到3mL 膜蛋白陈大豆肉汤(含5 %小,牛血清)中, 37 0C 、200 r/ min 振荡培养8h~ 10ho,NY/T 3188-2018,5. 2. 5. 5 如5 . 2 . 5 . 3 ,再次划线接种于膜蛋白陈大豆琼脂(含5%小牛血清)平板上并培养,5.2.5. 6 得到……

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